Гликозилирование в основном относится к ферментативному процессу присоединения гликанов к белкам, липидам или другим органическим молекулам и является наиболее распространенной посттрансляционной модификацией белка (ПТМ). Анализ гликозилирования очень сложен из-за сложности и изобарной природы присоединенных гликанов. С ростом применения в клинической практике белковой терапии, такой как моноклональные антитела, гликопротеины, гормоны, цитокины и факторы свертывания крови, обнаружение N-гликозилирования белка (также известного как N-гликаны, N-гликаны) привлекает все больше внимания.
N-гликаны представляют собой олигосахаридные структуры, содержащие Man3-GlcNAc2, которые соединены с полипептидной цепью белка через гликозидную связь между терминальным N-ацетилглюкозамином (GlcNAc) и группой NH2 аспарагина. В настоящее время профилирование N-гликанов может использоваться для анализа гликанов и их типов с использованием технологий MALDI TOF MS или UHPLC.
MALDI-TOF обладает высокой чувствительностью для структурной характеристики гликозилированных соединений и может достигать высокопроизводительного обнаружения. Анализ N-сахара на основе ЖХ-МС является в настоящее время основным аналитическим методом. Гидрофильная хроматография взаимодействия (HILIC) может использоваться для анализа N-сахара. N-сахара, высвобождаемые ферментативной реакцией PNGase F, дериватизируются с помощью 2-аминобензамида (2-AB), и дериватизированные сахарные цепи измеряются. Его можно использовать для анализа N-сахаров в большом количестве образцов. Перед флуоресцентной маркировкой, если имеется большое количество детергентов, нелетучих солей или веществ со свободными аминогруппами, которые могут помешать реакции дериватизации, N-сахара можно очистить с помощью колонки TSK Amide-80. Меченые N-сахара анализируются с помощью HILIC-UHPLC MS.
Лаборатория управляется сертифицированной системой контроля качества ISO9001 и аккредитована национальной лабораторией CNAS для предоставления клиентам услуг по исследованию качества лекарственных средств, соответствующих мировым фармацевтическим нормам. На основе высокопроизводительной платформы масс-спектрометрии мы предоставляем вам комплексные услуги анализа спектра пептидных препаратов N-гликанов. Вам нужно только сообщить нам цель вашего эксперимента и отправить нам образцы. Мы будем нести ответственность за все последующие действия по проекту, включая обработку образцов, анализ на машине, анализ данных и отчетность по проекту.